Формы выписок из ЕГРН, а также порядок их заполнения и выдачи приведены в соответствие с действующим законодательством РФ
- Главная
- Правовые ресурсы
- «Горячие» документы
- Приказ Минэкономразвития России от 29.03.2019 N 172 «О внесении изменений в приказ Минэкономразвития России от 20 июня 2016 г. N 378 «Об утверждении отдельных форм выписок из Единого государственного реестра недвижимости, состава содержащихся в них сведений и порядка их заполнения, а также требований к формату документов, содержащих сведения Единого государственного реестра недвижимости и предоставляемых в электронном виде, определении видов предоставления сведений, содержащихся в Едином государственном реестре недвижимости, и о внесении изменений в порядок предоставления сведений, содержащихся в Едином государственном реестре недвижимости, утвержденный приказом Минэкономразвития России от 23 декабря 2015 г. N 968»
Приказ Минэкономразвития России от 29.03.2019 N 172 «О внесении изменений в приказ Минэкономразвития России от 20 июня 2016 г. N 378 «Об утверждении отдельных форм выписок из Единого государственного реестра недвижимости, состава содержащихся в них сведений и порядка их заполнения, а также требований к формату документов, содержащих сведения Единого государственного реестра недвижимости и предоставляемых в электронном виде, определении видов предоставления сведений, содержащихся в Едином государственном реестре недвижимости, и о внесении изменений в порядок предоставления сведений, содержащихся в Едином государственном реестре недвижимости, утвержденный приказом Минэкономразвития России от 23 декабря 2015 г. N 968»
В частности, в соответствии с Федеральным законом от 03.08.2018 N 341-ФЗ «О внесении изменений в Земельный кодекс Российской Федерации и отдельные законодательные акты Российской Федерации в части упрощения размещения линейных объектов» и Федеральным законом от 03.08.2018 N 342-ФЗ «О внесении изменений в Градостроительный кодекс Российской Федерации и отдельные законодательные акты Российской Федерации»:
— форма выписки из ЕГРН об основных характеристиках и зарегистрированных правах на объект недвижимости дополнена реквизитом «Местоположение»;
— уточнены наименования глав Порядка заполнения отдельных форм выписок из ЕГРН;
— скорректированы правила заполнения некоторых реквизитов выписок, в частности, реквизитов «Цель установления публичного сервитута», «Срок, на который установлена зона с особыми условиями использования территории, публичный сервитут» и других;
— обновлены формы выписки о зоне с особыми условиями использования территорий, территориальной зоне, публичном сервитуте, территории объекта культурного наследия, территории опережающего социально-экономического развития, зоне территориального развития в РФ, игорной зоне, лесничестве, особо охраняемой природной территории, особой экономической зоне, охотничьем угодье, береговой линии (границе водного объекта), проекте межевания территории и выписки о границе между субъектами РФ, границе муниципального образования в границе населенного пункта.
Перейти в текст документа »
Больше документов и разъяснений по коронавирусу и антикризисным мерам — в системе КонсультантПлюс.
Зарегистрируйся и получи пробный доступ
Дата публикации на сайте: 07.08.2019
Поделиться ссылкой:
Новации по вопросам предоставления сведений об объектах недвижимости, содержащихся в ЕГРН.
С 5 октября 2018 года вступили в силу важные изменения в некоторые приказы Минэкономразвития России по вопросам предоставления сведений, содержащихся в ЕГРН.
Для идентификации объекта недвижимости, в отношении которого запрашиваются сведения, в обязательном порядке указывается либо его кадастровый номер (ранее присвоенный государственный учетный номер), либо его адрес и площадь.
В реквизиты выписок из ЕГРН об объекте недвижимости добавлено время государственной регистрации права. Таким образом, в выписках указываются вид зарегистрированного права, номер, дата и время государственной регистрации данного права согласно записи ЕГРН.
Также указываются реквизиты документа, на основании которого зарегистрировано ограничение прав и обременение объекта недвижимости (наименование, дата, номер – при наличии) и документ, на основании которого в ЕГРН были внесены изменения в записи о зарегистрированном ограничении прав и обременении объекта недвижимости. Если таким документом является зарегистрированный договор, также указываются реквизиты изменяющего его соглашение, зарегистрированного в ЕГРН.
Формы выписки из ЕГРН об основных характеристиках и зарегистрированных правах, выписки из ЕГРН о переходе прав на объекты недвижимости дополнены реквизитом «Сведения об осуществлении государственной регистрации сделки, права без необходимого в силу закона согласия третьего лица, органа».
Теперь выписка выдается, в том числе, по результатам исправления технической ошибки в записях ЕГРН и если в ранее выданных документах, удостоверяющих (удостоверявших) проведение государственного кадастрового учета и (или) государственную регистрацию возникновения или перехода прав на недвижимое имущество, была допущена техническая ошибка.
В целом, расширен состав реквизитов сведений об ограничениях прав и обременении объектов недвижимости в формах выписок из ЕГРН, что позволяет предоставлять актуальные сведения ЕГРН по запросам граждан и организации в наиболее полном объеме.
Декларация об объекте недвижимого имущества — бланк
Декларация об объекте недвижимого имущества необходима для узаконивания объектов, возведенных без предварительно полученных разрешений. На ее основании данные об объекте недвижимости вносятся в базу ЕГРН. Задекларировать можно в т.ч. здания, сооружения, отдельные помещения, незавершенные объекты.
Обязанность по составлению и подаче декларации возлагается на правообладателя имущества или его представителя. При этом декларацию о созданных объектах подает правообладатель земельного участка, на котором возведено здание (сооружение, объект незавершенного строительства). Если объекты недвижимости относятся к категории бесхозяйных, декларация оформляется органами местного самоуправления, на чьей территории они находятся.
Правовое регулирование процедуры осуществляется Федеральным законом о госрегистрации недвижимости от 13.07.2015 г. № 218-ФЗ, форма декларации и порядок ее заполнения регламентируется Приказом Минэкономразвития от 18.12.2015 г. № 953 (ред. от 25.09.2019).
Декларация об объекте недвижимого имущества: образец
Заполнение декларации возможно вручную или машинописным способом. Все данные вводятся только на русском языке. Декларационная форма является неотъемлемой частью технического плана. При помощи техплана с прилагаемой декларацией возможна постановка соответствующего объекта на кадастровый учет, если относительно него законом не предусмотрено разрешение на ввод в эксплуатацию, проектная документация и техпаспорт, проект перепланировки. Таким образом собственник сообщает регистрирующему органу о своих правах на имущество и передает характеристики объекта.
Как получить декларацию об объекте недвижимого имущества? Бланк можно взять из Приказа Минэкономразвития № 953 (приложение № 3) либо на сайте ]]>Росреестра]]>. Также его можно скачать в конце этой статьи.
Документ должен иметь сквозную нумерацию страниц, все предусмотренные формой поля следует заполнять, а когда сведений для внесения в соответствующую строку нет, ставится прочерк.
Если документ формируется и подается в Росреестр в электронном формате, внесенные в него сведения заверяются усиленной квалифицированной электронной подписью.
При подаче бумажного документа его необходимо прошить. В конце ставится дата заполнения и подпись лица, заполнившего декларацию (физлица или его представителя, руководителя юрлица, представителя органа власти и т.д.), с расшифровкой. При наличии ставится печать.
Как заполняется декларация об объекте недвижимого имущества — бланк предусматривает внесение следующей информации:
1. В пункте 1.1 сначала отмечается вид объекта недвижимости (знаком «V»), а затем в пунктах 1.2 – 1.7 указываются назначение и вид соответствующей недвижимости, в п. 1.8 — наименование, в п. 1 — вид разрешенного использования.
2. В пункте 2 прописывается адрес (местоположение) регистрируемого объекта в соответствии с системой ФИАС.
3. В пункте 3 отражается номер кадастрового квартала, к которому относится объект недвижимости – узнать этот параметр можно из данных ]]>Публичной кадастровой карты]]>.
4. В пункте 4 надо указать кадастровый номер актива.
5. В пункте 5 описывается регистрируемая недвижимость – этажность, дата завершения строительства, материал стен, размеры сооружений, степень готовности и площадь недостроенных объектов, сведения об отнесении постройки к объектам культурного наследия.
6. В пункте 6 вводятся данные правообладателя недвижимости. Если декларация составляется на созданное здание, указывается собственник земельного участка, на котором расположен возведенный объект.
7. Пункт 7 заполняется в случаях, когда документ оформлен и подан не правообладателем, а его представителем.
8. В разделе 8 перечисляются имеющиеся у собственника правоудостоверяющие документы на объект/земельный участок, на котором расположен регистрируемый объект.
9. Далее проставляется подпись, подтверждается согласие на обработку персональных данных, перечисляются прилагаемые к декларации документы.
Подробная инструкция заполнения приведена в приложении № 4 к Приказу № 953.
Читайте также: Как получить сведения из ЕГРН онлайн (Росреестр) бесплатно
Если утеряны или утрачены документы на участок и возведенные на нем постройки, но ранее объект был поставлен на кадастровый учет (например, уже подавалась декларация об объекте недвижимого имущества), как восстановить документы на недвижимость? Для получения дубликатов правоустанавливающих или правоудостоверяющих документов необходимо обратиться в территориальный орган Росреестра.
Сроки рассмотрения документов на постановку объектов недвижимости на кадастровый учет регламентированы ст. 16 Закона № 218-ФЗ. Государственная регистрация прав осуществляется в среднем в течение 7-9 рабочих дней с момента подачи соответствующего заявления и приложений к нему. Если документы подаются напрямую в Росреестр, сроки их рассмотрения будут минимальными, если действовать через МФЦ, то период ожидания будет более длительным.
Получение выписки из Единого государственного реестра недвижимости о кадастровой стоимости объекта недвижимости
С 01.01.2017 вступили в силу изменения в Федеральный закон от 29.07.1998 № 135-ФЗ «Об оценочной деятельности в Российской Федерации».
Теперь обязательным документом, прилагаемым к Заявлению о пересмотре кадастровой стоимости объекта недвижимости, которое подается в Комиссию по рассмотрению споров о результатах определения кадастровой стоимости, действующую при Управлении Росреестра по Новосибирской области, является выписка из Единого государственного реестра недвижимости (ЕГРН) о кадастровой стоимости объекта недвижимости.
Выписка из ЕГРН о кадастровой стоимости объекта недвижимости содержит следующие сведения: вид объекта и его кадастровый номер, величина кадастровой стоимости, дата ее утверждения, реквизиты акта об утверждении кадастровой стоимости, а также дата ее внесения в ЕГРН, даты подачи заявления о пересмотре кадастровой стоимости и начала применения кадастровой стоимости. Сведения из ЕГРН о кадастровой стоимости объекта недвижимости можно запросить по состоянию на дату запроса или на другую интересующую дату.
Получить выписку из ЕГРН о кадастровой стоимости объекта недвижимости может любое заинтересованное лицо удобным для него способом:
— при личном обращении в любой пункт приема Кадастровой палаты или МФЦ;
— в электронном виде, воспользовавшись сервисом на сайте Росреестра. В этих целях с главной страницы сайта перейти в раздел «Физическим лицам» или «Юридическим лицам», в разделе «Электронные Сервисы» выбрать сервис «Получение сведений из ЕГРН», сформировать запрос «Получить выписку из ЕГРН о кадастровой стоимости объекта недвижимости».
Сведения из ЕГРН предоставляются в течение 3 рабочих дней.
Выписка из ЕГРН о кадастровой стоимости объекта недвижимости предоставляется бесплатно.
Воспользовавшись услугами в электронном виде, заявитель получает такие преимущества, как экономия времени, исключение влияния человеческого фактора. Заявитель не теряет времени на визит в офис, а может получить услугу или воспользоваться сервисом на портале Росреестра, находясь дома или на работе.
*Форма выписки из Единого государственного реестра недвижимости о кадастровой стоимости объекта недвижимости утверждена приказом Минэкономразвития России от 25.12.2015 № 975 (приложение № 3).
Перечень документов и типовые формы
В случае отсутствия возможности предоставить АРБПиЭО, допускается предоставление следующих документов: акт допуска электроустановки в эксплуатацию, технические условия и акт их выполнения, договор на строительство, паспорта на оборудование, проект и сметы, договор купли-продажи объекта, договор энергоснабжения.
Протокол общего собрания с решением о передаче электросетевого имущества в ПАО «МРСК Юга» на праве собственности или ином законном праве согласно требованиям Устава (приложения к протоколу: перечень передаваемого имущества, перечень фактически запитанных потребителей).
Документы, подтверждающие право собственности или иное законное право на объект/объекты электросетевого хозяйства.
Выписка из ЕГРН (выписка об объекте недвижимости) со сроком выдачи не ранее 30 дней до представления в Общество по каждому объекту недвижимого имущества. При ее отсутствии допускается предоствление актуальной выписки из ЕГРН по любой иной установленной законодательством форме (выписка об основных характеристиках и зарегистрированных правах на объект недвижимости, выписка о переходе прав на объект недвижимости, выписка о правах отдельного лица на имевшиеся (имеющиеся) у него объекты недвижимости).
Кадастровый паспорт объекта недвижимости, выданный до 01.01.2017 (при наличии).
Документы, подтверждающие права на земельный участок (земельные участки), на котором(-ых) находится объект недвижимости -выписка из ЕГРН (выписка об объекте недвижимости), подтверждающая право собственности или договор аренды.
Уведомление об установлении охранных зон иные документы, подтверждающие установление охранных зон на передаваемые электросетевые объекты.
В отношении объекта недвижимости, который находится в процессе строительства, предоставляются:
— документы, подтверждающие права на земельный участок (земельные участки), на котором(-ых) возводится объект недвижимости — свидетельство о праве собственности или договор аренды.
— разрешение на строительство (срок действия которого не истек).
— договор подряда и документы, подтверждающие исполнение договора подряда, или выписку из ЕГРН на объект незавершенного строительства (если была проведена регистрация).
— документы, подтверждающие реконструкцию, капитальный ремонт объекта капитального строительства, в случае проведения такой реконструкции / капитального ремонта (договор подряда на проведение работ, документы, выдаваемые органами государственного строительного надзора
и т.д.).
В отношении объекта движимого имущества предоставляются документы, подтверждающие основание возникновения права собственности на движимое имущество и его полную оплату (копии договоров, накладных, платежных документов, вступившие в законную силу судебные акты об установлении права на имущество, акты органов государственной власти или органов местного самоуправления, свидетельства о праве на наследство, разделительный баланс и передаточный акт и пр.), регистры бухгалтерского учета на передаваемое имущество (при наличии).
Росреестр вводит новый вид выписки о недвижимости. О чём идёт речь
О том, что новый вид выписки из Единого госреестра недвижимости начнет выдавать Росреестр, сообщает пресс-служба ведомства.
В документе будут указываться установленные в пользу конкретного лица ограничения прав и сведения об обременениях его недвижимости. Такие выписки из ЕГРН начнут выдавать с 2023 года. Это предусмотрено проектом приказа ведомства. С помощью новой выписки можно будет получить информацию по таким, установленным в пользу конкретного лица, ограничениям прав как ипотека, аренда, рента и сервитут, — отмечает Российская газета.
Сейчас информация об установленных в пользу отдельного лица ограничениях прав и обременениях недвижимости — составная частью выписки из ЕГРН об объекте недвижимости или выписки из ЕГРН об основных характеристиках и зарегистрированных правах на объект, поясняет статс-секретарь — замруководителя Росреестра Алексей Бутовецкий. То есть посмотреть эти сведения можно только применительно к конкретному объекту.
С учетом потребности граждан и профессиональных участников рынка мы решили ввести отдельный вид выписки, из которой можно будет узнать обобщенную информацию об ограничениях прав и обременениях на все объекты недвижимости, установленных в пользу конкретного лица, — говорит эксперт.
Поскольку информация в выписке относится к сведениям ограниченного доступа, запросить новый вид документа сможет только сам владелец недвижимости, а также лица, перечисленные в ст. 62 закона о госрегистрации недвижимости (руководители органов власти, МФЦ, наследники собственника, арбитражные управляющие и др.). Новый вид документа пригодится, к примеру, тем, кто сдает в аренду или продает сразу несколько объектов, для отчетности, такую информацию могут запрашивать банки или суды, чтобы понять ситуацию с конкретным человеком.
Введение нового вида выписки из ЕГРН направлено на повышение прозрачности рынка недвижимости, считает президент Российской гильдии риелторов, член общественного совета при Росреестре Игорь Горский:
Новая выписка позволит гражданам и участникам рынка получать максимально объективную информацию об обременениях объекта недвижимости, что ускорит принятие решений по сделкам и в целом повлияет на оборот рынка недвижимости.
Кроме того, согласно проекту приказа, с 1 февраля 2022 года в общедоступную выписку из ЕГРН будут включаться сведения о признании многоквартирного дома аварийным и подлежащим сносу или реконструкции или же о признании жилого помещения, в том числе жилого дома, непригодным для проживания.
Источник: Российская газета
О недвижимости в Крыму и в Севастополе — здесь.
*Все используемые изображения и видео являются собственностью правообладателей.
Расскажи друзьям!
Срочные сообщения – в Telegram-канале. Подпишись!
Желаете оставить комментарий? Опуститесь чуточку ниже✎..
Оценка токсичности гидроэтанольного экстракта каланхоэ бразильского (Crassulaceae) листьев
In vivo и in vitro. Вид Kalanchoe brasiliensis , известный как «Saião , » обладает противовоспалительным, противомикробным действием. Он также содержит флавоноиды кверцетин и кемпферол, которые обладают терапевтическим действием. При широком распространении, помимо определенных терапевтических свойств, необходимо изучение возможных побочных эффектов.Целью данного исследования является оценка токсичности in vitro и in vivo гидроэтанольного экстракта листьев K. brasiliensis . Действие экстракта (концентрации от 0,1 до 1000 мкл / 100 мкл) на нормальные и опухолевые клетки оценивали методом МТТ. Острую токсичность и субхроническую токсичность оценивали на мышах в дозах от 250 до 1000 мг / кг перорально в соответствии с признанными протоколами. Результаты in vitro показали цитотоксическую активность для клеточной линии 3T3 (нормальная) и 786-0 (карцинома почки), показывая, что активность зависит от концентрации, достигая 92.23% ингибирование клеток. In vivo экстракт не проявил значительной токсичности; только изменения печени, связанные с острой токсичностью и некоторыми признаками поражения печени, объединение биохимических и гистологических данных. В целом экстракт показал низкую токсичность или отсутствие токсичности, представляя себя безопасным для использования с многообещающим терапевтическим потенциалом.
1. Введение
Род Kalanchoe является одним из наиболее важных родов семейства Crassulaceae, используемых в традиционной медицине, и насчитывает около 125 видов.Среди этих видов выделяется Kalanchoe brasiliensis Cambess, широко известная как «Saião» и «coirama , » и широко используется в традиционной медицине для лечения кашля, рожи и других заболеваний благодаря своим антибиотикам. -воспалительное действие [1]. Вид является родным для Бразилии, распространен от Сан-Паулу на северо-восток, в основном в прибрежной зоне [1].
Что касается химического строения, основными компонентами, описанными в листьях Kalanchoe brasiliensis , являются гликозилированные флавоноиды, полученные из агликона патулетина и эупафолина [2] антимикробное и главным образом противовоспалительное действие [1–8].
Токсичность вида K. brasiliensis на протяжении многих лет была плохо изучена, поэтому его важность в народной медицине и небольшое количество исследований, подтверждающих его безопасное использование, выявили необходимость проведения исследований токсичности K. brasiliensis . Таким образом, цель настоящей работы заключалась в оценке токсичности in vivo и in vitro гидроэтанольного экстракта листьев Kalanchoe brasiliensis (Crassulaceae).
2. Материалы и методы
2.1. Растительный материал
Листья Kalanchoe brasiliensis были собраны в городе Макайба (координаты: 5 ° 51′30′′S 35 ° 21′14′′′W), Риу-Гранди-ду-Норти, Бразилия, в сентябре 2010 года. ботаническая идентификация была выполнена доктором Марией Ирасема Безерра Лойола, а ваучер был депонирован в Гербарий Центра биологических наук Федерального университета Риу-Гранди-ду-Норти, Бразилия (UFRN 5468). Сбор растительного материала проводился с разрешения Бразильской системы информации о биоразнообразии (SISBIO) (номер процесса: 35017).
Экстракт готовили и анализировали в соответствии с методологией, описанной Costa et al. (2015) и Fernandes et al. (2016) и назначен профессором д-ром Сильвана Мария Зуколотто из лаборатории фармакогнозии УФРН. Для оценки токсичности in vivo экстракт разводили в 0,9% физиологическом растворе, а для определения токсичности in vitro экстракт разводили в культуральной среде.
2.2. Животные
Протоколы экспериментов были одобрены Комитетом по этике животных Федерального университета Риу-Гранди-ду-Норти (Протокол 002/2013).Самцы и самки Swiss мышей (Mus musculus) , в возрасте 6–8 недель, массой г, содержались в виварии Центра медицинских наук УФРН при контролируемом освещении (12-часовой цикл свет / темнота) и температуре (° C). условия. Они получали воду и коммерческую пищу без ограничений.
2.3. Острая токсикологическая оценка
Случайным образом 48 животных были разделены (/ пол / группа) на экспериментальные группы, получавшие пероральные дозы 250, 500 и 1000 мг / кг, а контрольная группа получала физиологический раствор через соответствующую канюлю в виде однократной дозы [9– 11].
Мышей наблюдали в течение первых 24 часов на предмет появления каких-либо непосредственных признаков токсичности и ежедневно в течение 14 дней для наблюдения за смертью, изменениями поведения и любым острым отсроченным эффектом. Вес тела и потребление пищи и воды измеряли через день. Через 14 дней животных анестезировали тиопенталом в дозе 40 мг / кг (Tiopentax®, Cristália) внутрибрюшинно (в / б) и подвергали эвтаназии путем смещения шейных позвонков в соответствии с Правилами CONCEA от 2016 г. [12].
2.4. Субхроническая токсикологическая оценка
40 животных были рандомизированы (/ пол / группа) в экспериментальные группы, которые получали пероральные дозы 250, 500 и 1000 мг / кг в течение 30 дней, и контрольная группа, получавшая физиологический раствор через соответствующую канюлю один раз в день. доза [10, 11, 13]. Мышей наблюдали в течение первых 24 часов на предмет появления каких-либо непосредственных признаков токсичности и ежедневно в течение 30 дней. Вес тела и потребление пищи и воды измеряли через день.Через 30 дней животных анестезировали тиопенталом в дозе 40 мг / кг (Тиопентакс, Кристалия, Бразилия) внутрибрюшинно (внутрибрюшинно) и подвергали эвтаназии путем смещения шейных позвонков в соответствии с Правилами CONCEA [12].
2,5. Биохимические и гематологические определения
Образцы крови были получены путем пункции сердца и собраны без антикоагулянта для биохимических дозировок и с антикоагулянтом (EDTA) для общего анализа крови. Биохимические параметры, проанализированные в сыворотке крови, включали глюкозу (G), общий холестерин (TC), триглицериды (TG), аспартатаминотрансферазу (AST), аланинаминотрансферазу (ALT), мочевину (Ur), креатинин (Cr) и общий белок (TP ), выполняемый с помощью соответствующих диагностических наборов для автоматического биохимического анализатора Labmax Plenno (Labtest, Бразилия).Анализируемыми гематологическими параметрами были количество лейкоцитов (WBC) и дифференциальный подсчет лейкоцитов, тромбоцитов, гематокрит и гемоглобин (Hb), средний корпускулярный объем (MCV), средний корпускулярный гемоглобин (MCH) и средняя концентрация корпускулярного гемоглобина (MCHC). на автоматическом анализаторе ABX Micros 60-OT (Horiba ABX, Япония).
2.6. Гистопатологический анализ
Для гистопатологического анализа фрагменты собранных органов (почка, печень и селезенка) исследовали макроскопически, взвешивали и рассчитывали отношение массы органа к общей массе тела.Фрагменты были зафиксированы в 10% формальдегиде и переданы профессору Клаудии Нунес Оливейра на гистологический анализ на кафедру патологии Федерального университета Риу-Гранди-ду-Норти. Их окрашивали гематоксилином и эозином, а параметры повреждения тканей исследовали на предмет наличия или отсутствия апоптоза, некроза, гидропической дегенерации, стеатоза, холестаза, пластической пролиферации, фиброза, воспалительной реакции, набухания канальцев и отека [14].
2.7. Клеточная культура
Клеточные линии из неопухолевых фибробластов мыши (3T3) и линии клеток фибробластов мышей с карциномой почек (786-0) были пожертвованы профессором Dr.Hugo Alexandre de Oliveira Rocha с кафедры биохимии Федерального университета Риу-Гранди-ду-Норти, приобретенный у Американской коллекции типовых культур (ATCC, Роквилл, Мэриленд, США). Их поддерживали в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM) (Sigma-Aldrich, Co., Германия), с добавлением 10% FBS в концентрации 2,5 × 10 4 / мл в 10 мл среды в 75 см 3 флакон для культивирования. Клетки отбирали каждые два дня с использованием 0,25% трипсина в PBS, центрифугировали и ресуспендировали в свежей культуральной среде.
2,8. Анализ жизнеспособности клеток / МТТ (3- (4,5-диметилтиазол-2-ил) -2,5-дифенилтетразолий бромид)
Жизнеспособность клеток водно-спиртового экстракта анализировали в культурах клеток при различных концентрациях и периодах времени. Клетки высевали в 96-луночные микропланшеты при концентрации клеток на лунку. Их помещали в среду DMEM с добавлением 10% FBS для поддержания и роста клеток и выдерживали в течение 24 часов в инкубаторе при 36,5 ° C с 5% CO 2 . Впоследствии пластину лишили и оставили на 24 часа в тех же условиях.После удаления надосадочной жидкости в среду DMEM (10% FBS) в трех экземплярах добавляли концентрации 1, 10, 10 2 , 10 3 и 10 4 мкл / мл экстракта в среде DMEM (10% FBS). пластина. После 24-, 48- и 72-часовой инкубации все содержимое среды в микропланшетах было выброшено; в лунки добавляли реагент 10% МТТ (Oz Biosciences, Сан-Диего, США). Через 4 часа супернатант сливали и добавляли 100 мкл л абсолютного этанола для солюбилизации образовавшихся кристаллов.Оптическую плотность каждой лунки измеряли в Elisa Reader 570 нм [15, 16].
2.9. Статистический анализ
Статистический анализ выполняли с использованием SPSS v.20 для Windows (SPSS, Чикаго, Иллинойс, США). Для независимых выборок применяли дисперсионный анализ с посттестом Тьюки-Крамера. Непараметрические переменные анализировались с помощью критерия Краскела-Уоллиса. Гистопатологические анализы оценивали с помощью теста Фишера. Все тесты рассчитывались с уровнем значимости 5%.
3. Результаты и обсуждение
3.1. Оценка острой и субхронической токсичности
При оценке острой токсичности биохимические параметры глюкозы, триглицеридов, АЛТ и креатинина показали значительную разницу () между группами животных (Таблица 1). При субхронической оценке параметры глюкозы, AST и креатинина показали значительную разницу () между группами (таблица 2).
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Значения выражены как среднее ± стандартное отклонение ().AST: аспартатаминотрансфераза; АЛТ: аланинаминотрансфераза; TP: общий белок. представление статистической разницы с контрольной группой (). | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Значения выражены как среднее ± стандартное rd отклонение ().AST: аспартатаминотрансфераза; АЛТ: аланинаминотрансфераза; TP: общий белок. представление статистической разницы с контрольной группой (). | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
В тестах на гематоксичность не было статистически значимой разницы между группами; однако мужская группа при дозе 1000 мг / кг представила высокие гранулоциты по сравнению с контрольной группой (), и были различия между мужчинами и женщинами контрольных групп по гематокриту, тромбоцитам, лимфоцитам и моноцитам.
3.2. Гистопатологический анализ
Гистопатологический анализ показал неизменные результаты у большинства животных. Стеатоз печени (EH), воспалительная реакция (RI), экстраспинальный гемопоэз (ESH), застой в печени (CH) и почечный застой (CR) не показали различий между любой из групп.
Поджелудочная железа не показала гистологических изменений ни у одного из животных при остром и субхроническом обследовании, а также гистопатологии почек при остром обследовании.Однако при субхронической оценке клеточный инфильтрат в почках был выявлен у женщин из групп 500 и 1000 мг / кг.
Апоптоз присутствовал в группах доз 500 мг / кг и 1000 мг / кг в остром исследовании (рис. 1). Субхроническая оценка показала умеренный стеатоз (рис. 2 (а)) и точечный ишемический некроз в группе, получавшей дозу 1000 мг / кг (рис. 2 (б)).
3.3. Оценка жизнеспособности клеток
За 24-часовой период у штамма 3T3 экстракт показал жизнеспособность клеток при концентрациях от 10 до 10 3 μ мкг / мл и снижение жизнеспособности клеток при концентрациях 1 и 10 4 μ мкг / мл до 80%, а также через 48 часов при концентрациях от 1 до 10 2 μ мкг / мл в диапазоне от 10,34 до 25,74%.Концентрации 10 3 и 10 4 мк мкг / мл показали жизнеспособность клеток 93,99%; и через 72 часа все концентрации вызывали нарушение жизнеспособности клеток в диапазоне от 10,53 до 79,81% (рис. 3).
У клеток 786-0 за 24-часовой период жизнеспособность клеток снижена при всех концентрациях, при этом 10 3 мк мкг / мл нарушены в 61,68%; через 48 часов также наблюдалось снижение жизнеспособности клеток на 89,65% и 72,57% в концентрациях 10 3 и 10 4 мк г / мл соответственно, а также через 72 часа. , в концентрациях 10 2 , 10 3 и 10 4 мк мкг / мл, и было нарушение жизнеспособности клеток на 91,59%, 92,26% и 84,44%. соответственно (рисунок 4).
Масса тела является одним из параметров, наиболее часто используемых в токсикологических оценках для индикации появления токсических эффектов определенного вещества в организме животного, а также снижения потребления воды и корма, изменения поведения, апатии и плохое состояние волос. Отсутствие этих сигналов между группами животных предполагает, что экстракт не проявляет токсичности в этих условиях. Литературные исследования подтверждают эти результаты [17, 18].
Биохимические параметры метаболически отражают физиологический статус животных, участвующих в исследовании токсичности. На уровень глюкозы может влиять несколько факторов, таких как диета и кишечная абсорбция [19]. Изменения, обнаруженные в глюкозе для острой оценки (доза 250 мг / кг) и субхронической оценки (самки доза 1000 мг / кг) не определяют развитие диабета у животных, поскольку может существовать конкуренция переносчика глюкозы с гликозилированным кверцетином. , влияющие на концентрацию глюкозы в сыворотке крови или даже стресс, от которого страдает животное [20].Кемпферол, также содержащийся в экстракте, стимулирует поглощение глюкозы клетками нормальных животных, но этим флавоноидам необходимо присутствие сахаров, связанных с функциональным ядром флавоноидов, чтобы инициировать их инсулиномиметическое действие [21, 22].
Однако часть сахара, связанная с флавоноидами, увеличивает полярность молекулы и вызывает стерические препятствия для связывания с белками-носителями в кровотоке; таким образом, более гликозилированная часть является свободной, отвечая за увеличение концентрации глюкозы при оценке токсичности.Кроме того, первоначальная перегрузка, которую могла испытать печень при метаболизме экстракта, могла повлиять на концентрацию глюкозы. И эта перегрузка больше не ощущается при субхронической оценке [23].
Возможное объяснение расхождений между результатами этого исследования и литературой может быть связано с выбором пути введения, дозы, типа экстракта и вида животных, на которых тестировались экстракты.
При острой и субхронической оценке профили триглицеридов были схожими, с меньшими средними триглицеридами с увеличением дозы, с разницей в острой оценке (доза 1000 мг / кг) и субхронической оценке (женская доза 250 мг / кг).Предполагается, что экстракт проявляет активность в отношении триглицеридов, но механизм действия не может быть описан; только предполагается, что за активность отвечает ингибирующее действие ферментов этого метаболизма или повышение антиоксидантной активности флавоноидов, присутствующих в этом растительном экстракте [24].
Общий холестерин не отличался между группами. Исследования растений с гипохолестеринемическим действием коррелируют этот эффект с ингибированием ферментов, участвующих в метаболизме липидов действием, в основном флавоноидов, которые действуют с антиоксидантным эффектом за счет снижения липопероксидации и повышения активности антиоксидантных ферментов [25, 26].
Ферменты печени аспартатаминотрансфераза (AST) и аланинаминотрансфераза (ALT) оценивали повреждение печени. Более высокая активность АЛТ в группах доз 500 и 1000 мг / кг у женщин и 500 мг / кг у мужчин в остром анализе указывает на повреждение печени, подчеркивая острую токсичность в этих дозах [24, 26, 27]. Самки более восприимчивы к изменениям, что можно лучше понять с помощью гистопатологических данных. Изменение AST (мужская доза 1000 мг / кг) при субхронической оценке предполагает, что экстракт вызвал более глубокое поражение органа, что визуализировалось при гистопатологическом анализе.
Общий белок, синтезируемый печенью, отражает функциональную способность печени, которая не проявляет гепатоцеллюлярный токсический эффект при данной дозировке. Дозы АСТ, АЛТ и общих белков демонстрируют печеночный профиль, оцениваемый по поражению и функции, и можно утверждать, что экстракт K. brasiliensis не способствует серьезным нарушениям функции печени, поскольку функция синтеза органа остается неизменным, а изменение фермента ALT в печени показывает, что повреждение может быть обратимым [24, 27].Функция почек, проанализированная с помощью дозировок мочевины и креатинина, не показала изменений, соответствующих токсичности при острой и субхронической оценке. Однако при острой оценке (женщины доза 1000 мг / кг) и субхронической оценке (женщины доза 500 мг / кг) наблюдались некоторые различия в мочевине, которые могут быть связаны с гистологическими данными, и поэтому предполагается, что экстракт действительно не вызывать повреждения почек из-за наличия защитных соединений, таких как кверцетин, обеспечивая безопасность экстракта.
С другой стороны, креатинин (женская доза 1000 мг / кг) имел различие и, возможно, происходило из-за действия женских гормонов или мышечной массы, меньшей, чем у мужчин, и его действие не было связано с экстрактом.
Также предполагается, что изменения гематологических параметров не связаны с эффектами, вызванными экстрактом, поскольку они являются ожидаемыми изменениями для вида [28, 29]. Некоторые исследования показали, что острый индуцированный стресс у животных вызывает выброс катехоламинов и набор лейкоцитов, которые вызывают увеличение количества клеток в кровообращении, что наблюдалось при оценке субхронической токсичности в самой высокой дозе экстракта [30].
В гистопатологии обнаружение клеточной инфильтрации в почках при субхронической оценке, характерной для воспаления, имеет восходящий и тазовый характер, и, следовательно, это не связано с экстрактом, поскольку изменение происходит у женщин, которые больше восприимчивы к инфекциям мочевыводящих путей [31]. Острый апоптоз (дозы 500 и 1000 мг / кг) (рисунок 1) заслуживает внимания для этих доз, а также наличие точечного ишемического некроза (рисунок 2 (b)) при субхронической оценке (доза 1000 мг / кг). ), предполагая, что этот эффект повреждения клеток приписывается экстракту.
Исследования подтверждают безопасность экстракта благодаря поддержанию гистологической целостности почек, приписывая этот эффект кверцетину [20, 32]. Что касается гистологии печени, предполагается, что экстракт вызвал острое и легкое гепатоцеллюлярное повреждение, что подтверждается найденными биохимическими данными [19, 24, 25, 32].
Необходимо найти новые вещества, способные различать их действие на нормальные и раковые клетки. Это необходимый критерий для избирательного уничтожения раковых клеток, и отборные натуральные продукты стали крайне необходимыми [33].В этом исследовании при оценке жизнеспособности клеток нормальные клетки (3T3) не были повреждены экстрактом, тогда как для линии 786-0 наблюдалось значительное нарушение. Эти результаты подчеркивают важность углубленных исследований этого вида с многообещающей терапевтической активностью.
В предыдущей работе [2, 3] в нашей группе сообщалось о присутствии гликозилированных флавоноидов с агликонами, происходящими в основном из патулетина и эупафолина. Согласно этим результатам, можно предположить, что флавоноиды могут иметь активность К.brasiliensis в клетках 786-0, поскольку они действуют в контроле свободнорадикального патогенеза за счет восстановления алкилпероксильных радикалов (ROO — ) [34]. Исследования показали, что фенольные соединения могут действовать в профилактике рака, а также в ингибировании дифференцировки клеточного цикла, вызывая апоптоз [34–36]. Прооксидантный эффект кверцетина также может быть ответственным за цитотоксические и проапоптотические эффекты [20]. Более того, исследования Berger et al. (2013) показывают, что кемпферол действует на ингибирование гистоновых деацетилаз, которые связаны с развитием новообразований, предполагая, что экстракт является многообещающим для разработки противоопухолевых препаратов [37].
Одним из ограничений настоящего исследования является то, что токсичность ни одной из фракций этого экстракта еще не исследована, а также то, что животные очень чувствительны к стрессу, и это может отражаться на наблюдаемых параметрах. Однако этот недостаток не исключает результатов, полученных в данной работе.
4. Выводы
Экстракт листьев Kalanchoe brasiliensis нарушил жизнеспособность клеток в клеточной линии 786-0, особенно при более высоких дозах с аналогичным профилем клеточного ингибирования во все наблюдаемые периоды времени.Это исследование также продемонстрировало, что экстракт in vivo обладает низким острым токсическим действием , наиболее очевидным при дозе 1000 мг / кг, наблюдаемым в концентрациях ALT и гистопатологии печени. Что касается субхронической токсичности, на основании гистологических данных сделан вывод о низкой относительной токсичности. Экстракт листьев Kalanchoe brasiliensis представляет собой многообещающий объект исследования для разработки лекарственных трав. Однако по-прежнему необходимы дальнейшие исследования его токсичности, чтобы гарантировать его безопасность.
Раскрытие информации
Это исследование не получало какого-либо специального гранта от финансирующих агентств в государственном, коммерческом или некоммерческом секторах.
Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Выражение признательности
Авторы благодарны всей команде Laboratório de Pesquisa em Bioquímica Clínica e Experimental, Лаборатории фармакогнозии, Отделению биохимии UFRN и профессору Claudia из отделения патологии UFRN.
(PDF) Активность экстрактов листьев и коры боярышника по отношению к биологической мембране
, продемонстрированная экстрактом коры боярышника. Этот экстракт эффективно защищает липиды, экстрагированные из мембраны эритроцита
, от окисления и липиды, содержащиеся в мембране
; таким образом, вся мембрана кажется защищенной. Эти результаты были подтверждены как с помощью примененных методов
, так и для различных вызывающих окисление агентов
.Анализ полифенольного состава экстрактов
показал, что экстракт коры боярышника содержит на
полифенольных соединений больше, чем экстракт листьев. Высокая антиоксидантная активность экстракта коры
может быть связана с более высоким содержанием эпикатехина, димера PA типа B, тримера PA
типа B, процианидина B2 и процианидина C1 по сравнению с экстрактом листьев
.
Настоящие биофизические исследования влияния экстрактов коры и листьев терновника
на мембрану эритроцитов
показали, что содержащиеся в них полифенольные соединения
располагаются в основном в гидрофильной области мембраны
, вызывая изменения в этом регионе.В частности,
это местоположение подтверждено флуориметрическими и микроскопическими исследованиями
. Они показали, что экстракты изменяют порядок упаковки липидных полярных головок на
и вызывают образование
эхиноцитов. Вместо того, чтобы отрицательно влиять на структуру мембраны
, эти изменения укрепляют ее, делая ее более
устойчивой к колебаниям осмотического давления, что подтверждается исследованием осмотического сопротивления
. Таким образом, можно заключить, что полифенольные соединения, содержащиеся в экстрактах
, связываются с поверхностью мембраны, образуя барьер
для свободных радикалов, которые встречаются в прилегающей к мембране среде
.Такой механизм может помочь объяснить очень хорошие антиоксидантные свойства экстрактов
, которые за счет связывания свободных радикалов
удерживают их от проникновения через мембрану
и, таким образом, защищают липиды мембран от окисления
.
Исследования также показывают, что экстракты растений, богатые полифенолами
, могут применяться в качестве природных эффективных антиоксидантов
, которые защищают биологическую мембрану от окисления.
Кроме того, вещества благотворно модулируют свойства мембраны, уменьшая порядок упаковки
полярных головок мембранных липидов.Исследования, когда
расширены, могут предложить другие применения растительных экстрактов
в медицине, поскольку они могут влиять на свойства мембран в
различных патологических состояниях (например, диабет), например,
, ингибируя доступ сахаров к биологическая мембрана
без побочных эффектов.
Здесь следует подчеркнуть, что экстракты
листьев и плодов этого драгоценного растения в настоящее время широко используются в медицине
, за исключением экстракта коры
, который, как было показано, является гораздо лучшим антиоксидантом.
Этот экстракт можно также использовать во многих отраслях промышленности.
как профилактическое средство.
Благодарность Это исследование спонсировалось Министерством науки и образования
, научный проект N N 304 173840.
Открытый доступ Эта статья распространяется на условиях лицензии Creative Commons Attribution License
, которая разрешает любое использование, распространение
копирование и воспроизведение на любом носителе при условии упоминания оригинального автора (ов)
и источника.
Ссылки
Arora A, Strasburg GM (1997) Разработка и валидация флуоресцентных спектроскопических анализов
для оценки антиоксидантной эффективности. J Am Oil Chem Soc 74: 1031–1040
Arora A, Byrem TM, Nair MG, Strasburg GM (2000) Модуляция липосомальной жидкости
флавоноидами и изофлавоноидами.
Arch Biochem Biophys 373 (1): 102–109
Bernhardt I, Deuticke B (2003) Мембранные липиды и белки как
основа формы эритроцитов и их чередования.В: Bernhardt I, Ellory
JC (eds) Перенос эритроцитов через мембрану в условиях здоровья и болезней.
Springer, New York, pp 27–60
Bonarska-Kujawa D, Cyboran S, Oszmian
´
ski J, Kleszczyn
´
ska H
(2011) Экстракты из листьев и плодов яблони как эффективные антиоксиданты
. J Med Plants Res 5 (11): 2339–2347
Bonarska-Kujawa D, Sarapuk J, Bielecki K, Oszmian
´
ski J, Kles-
zczyn
´
ska H (2012) Антиоксидант активность экстрактов яблони,
аронии и клубники.Pol J Food Nutr Sci 62: 229–234
Bradford MM (1976) Быстрый и чувствительный метод квантования
микрограмм количества белка, использующий принцип связывания белка с красителем
. Anal Biochem 72: 248–254
Чанг К., Цзо З, Харрисон Ф, Чоу MSS (2002) Боярышник. J Clin
Pharmacol 42: 605–612
Chang WT, Dao J, Shao ZH (2005) Боярышник: потенциальная роль в
сердечно-сосудистых заболеваниях. Am J Chin Med 33: 1–10
Cheel J, Theoduloz C, Rodriguez JA, Caligari PDS, Schmeda-
Hirschmann G (2007) Активность по улавливанию свободных радикалов и содержание фенолов
в семянках и таламусе из Fragaria
chiloensis ssp.Chiloensis. F. vesca и F. x ananassa cv.
Chandler Food Chem 102: 36–44
Cyboran S, Bonarska-Kujawa D, Kapusta I, Oszmian
´
ski J, Kles-
zczyn
´
ska H (2011) Антиоксидантный потенциал полифенольные
экстракты из листьев деревьев и плодовых кустов. Curr Topics
Biophys 34: 15–21
Ding XP, Wang XT, Chen LL, Qi J, Xu T, Yu BY (2010) Определение качества и
антиоксидантной активности листьев Crataegus с использованием он-лайн
high- высокопроизводительная жидкостная хроматография с диодно-матричным детектором
, соединенным с детектором хемилюминесценции.Food Chem
120: 929–933
Dodge JT, Mitchell C, Hanahan DJ (1963) Препарат и химические характеристики
свободных от гемоглобина призраков эритро-
цитов. Arch Biochem 100: 119–130
Eaton LJ, Kinkade S (2003) Экстракт боярышника улучшает хроническую сердечную недостаточность
. J Fam Pract 52: 753–754
Gasiorowski K, Szyba K, Brokos B, Kozaczynska B, Jankowiak WM,
Oszmian
´
ski J (1997) Антимутагенная активность антоцианов
ocarpa, выделенных из аронии фрукты.Cancer Lett 119: 37–46
Gu L, Kelm MA, Hammerstone JF, Zhang Z, Beecher G, Holden J
(2003) Жидкостная хроматография / ионизационная масса с электрораспылением
Спектрометрические исследования проантоцианидинов в пищевых продуктах. J Mass
Spectrom 38 (12): 1272–1280
He Z, Xia W, Chen J (2008) Выделение и выяснение структуры фенольных соединений
в плодах китайской оливы (Canarium album L.).
Eur Food Res Technol 226: 1191–1196
Hvattum E, Ekeberg D (2003) Изучение индуцированного столкновением радикала
расщепления флавоноидных гликозидов с использованием отрицательного электрораспыления
ионизационной тандемной квадрупольной масс-спектрометрии.J Mass Spec —
trom 38: 43–49
A. Włoch et al .: Экстракт боярышника в биологических мембранах 555
123
Идентификация и аннотация ДНК плазмиды, выделенной из Chromobacterium violaceum
Был обнаружен первый бактериофаг в 1950-х годах 27 , и с тех пор количество и разнообразие новых вирусов, заражающих бактерии, значительно выросло, достигнув более 1300 проектов генома согласно базе данных NCBI. При исследовании условно-патогенного микроорганизма C.violaceum , в геномных препаратах мы наблюдали внехромосомную ДНК с высокой молекулярной массой (но ниже, чем она была бы, если бы это была геномная ДНК). Затем мы выделили и секвенировали эту предполагаемую плазмиду, которая, как оказалось, содержала гены из группы бактериофага / плазмиды P1.
После секвенирования C. violaceum 7 в геноме C. violaceum 28 было обнаружено присутствие четырех различных последовательностей профагов (CvP1-4). Ни один из них не имеет отношения к плазмиде, о которой мы здесь сообщаем.До этого хвостообразные частицы наблюдались в C . violaceum с помощью электронной микроскопии, хотя с ними не было связано никакой биологической активности 29,30 .
Согласно данным последовательности и аннотации, плазмида, основанная в C. violaceum , могла быть P1-подобным вирусом из-за присутствия генов, которые кодируют структурные вирусные частицы. Более того, гены, относящиеся к разделению плазмиды, и белок-инициатор плазмиды RepA являются убедительным доказательством классификации этой плазмиды как P1-подобного фага.Другой отличительной чертой P1-подобных фагов является присутствие токсин-антитоксиновых генов, которые составляют систему плазмидной зависимости. Предполагается, что в pChV1 две ORF являются генами токсина (ORF 13 и 37 с 52% и 90% идентичности, соответственно), хотя необходимы дальнейшие исследования для подтверждения присутствия этой системы.
В результате наших поисков гомологии мы обнаружили, что pChV1 имеет нуклеотидную последовательность, сильно отличающуюся от других фагов, описанных до сих пор. Эта функция затрудняет поиск фаговых последовательностей, таких как lox сайтов, incC и incA и других, которые, как правило, хорошо сохраняются между другими вирусами, но не исключает их существования в pChV1. .Однако повторяющиеся последовательности, которые основаны среди других фагов, также присутствуют в pChV1, например, инвертированная повторяющаяся последовательность длиной 19 п.н. (рис. 7).
Источниками репликации являются GC-бедные области, и их расположение в плазмиде может указывать на те места, где начинается репликация. Хотя мы не смогли предсказать конкретные последовательности, которые соответствовали бы источникам репликации в pChV1, профиль содержания GC и GC-skew показали две области, которые могут отражать oriR и oriL . oriR , который используется во время поддерживающей репликации плазмиды, находится в той же области, что и гены parA , parB и repA . Такое совместное расположение возможного ориджина репликации и генов поддержания плазмиды наблюдается в pChV1. Напротив, oriL связано с литическим ростом и отделено примерно в 9 т.п.н. от oriR в P1 31 . Мы предполагаем, что второй возможный ориджин репликации, основанный в pChV1 (расположенный примерно на 27 kbp), соответствует oriL .
Одна примечательная особенность заключается в том, что когда мы выровняли предсказанные открытые рамки считывания с помощью BLASTn (который выполняет поиск нуклеотидного запроса в базе данных нуклеотидов), мы не получили значимого результата. И наоборот, когда использовался BLASTx (поиск транслированного нуклеотидного запроса в базе данных белков), мы смогли идентифицировать гены с высокой степенью уверенности. Это означает, что в процессе эволюции этот вирус накопил много мутаций в своей последовательности ДНК, но сохранил — до некоторой степени — аминокислотный состав своих белков.Например, pChV1 имеет множество ORF, которые более чем на 90% идентичны другим генам, обнаруженным у бактерий (таблица 2). Когда мы выровняли те же самые ORF с помощью BLASTn, мы не получили какого-либо значимого результата.
Помимо присутствия связанных с фагом генов и последовательностей, некоторые важные элементы, которые делали бы pChV1 функциональным P1-фагом, все еще отсутствуют. 31 . Из-за отсутствия доказательств мы не можем сделать вывод, является ли эта плазмида умеренным P1-подобным фагом или это химерная ДНК, частично бактериофаг или плазмида.Более того, это может быть фрагмент ДНК, который поддерживается внутри C. violaceum системами зависимости, но не обладает способностью к лизогении. Напротив, хвостообразные частицы, наблюдаемые в 1970-х годах. 29,30 могут быть свидетельством того, что при стрессе будут продуцироваться фаговые белки, кодируемые pChV1.
Генетические мобильные элементы по-прежнему важны в области молекулярной биологии. Кроме того, использование фаговых систем в качестве инструментов позволило манипулировать геномами всех видов организмов.Таким образом, дальнейшее изучение pChV1 откроет новые способы изучения генетических аспектов C. violaceum и, возможно, других видов. Наконец, pChV1 с его большим количеством гипотетических ORF представляет собой богатый резервуар неизученных генов, которые могут способствовать нашему пониманию механизмов, лежащих в основе вирусных инфекций и плазмид.
Электронные журналы Thieme — Planta Medica / Abstract
Биологическая и фармакологическая активность
Оригинальные статьи
Emerson M.da S. Siqueira
1 Аспирантура по разработке лекарств и технологических инноваций, Лаборатория фармакогнозии, Фармацевтический факультет, UFRN, Натал, RN, Бразилия
,
Табата Л. К. Лима
2 Лаборатория иммунологии, фармацевтический факультет, УФРН, Натал, РН, Бразилия
,
Лаурита Бофф
6 Лаборатория прикладной вирусологии, Департамент фармацевтических наук, UFSC, Флорианополис, Южная Каролина, Бразилия
,
Сара Г.М. Лима
1 Аспирантура по разработке лекарств и технологических инноваций, Лаборатория фармакогнозии, Фармацевтический факультет, UFRN, Натал, RN, Бразилия
,
Estela M. G. Lourenço
1 Аспирантура в области разработки лекарственных средств и технологических инноваций, лаборатория фармакогнозии, фармацевтический факультет, УФРН, Натал, Род-Айленд, Бразилия
3 Лаборатория фармацевтической химии, Фармацевтический факультет, УФРН, Натал, Род-Айленд, Бразилия
,
Эдер Г.Феррейра
1 Аспирантура по разработке лекарств и технологических инноваций, лаборатория фармакогнозии, фармацевтический факультет, УФНН, Натал, Род-Айленд, Бразилия
4 Лаборатория биотехнологии природных полимеров, Департамент биохимии, UFRN, Натал, RN, Бразилия
,
Euzébio G. Barbosa
3 Лаборатория фармацевтической химии, Фармацевтический факультет, УФРН, Натал, Род-Айленд, Бразилия
,
Паула Р.Л. Мачадо
2 Лаборатория иммунологии, фармацевтический факультет, УФРН, Натал, РН, Бразилия
,
Клебер Дж. С. Фариас
2 Лаборатория иммунологии, фармацевтический факультет, УФРН, Натал, РН, Бразилия
,
Леандро де С. Феррейра
5 Лаборатория контроля качества, фармацевтический факультет, УФРН, Натал, RN, Бразилия
,
Hugo A. de O. Rocha
4 Лаборатория биотехнологии природных полимеров, Департамент биохимии, UFRN, Натал, RN, Бразилия
,
Cláudia M.